Display of large enzyme complexes on the cell surface of <i>Bacillus subtilis</i>
Notice bibliographique
Résumé
The ability to display multi‐subunit enzyme complexes on the bacterial cell surface offers opportunities to degrade complex polymers such as plant cellulose in an efficient and cooperative manner. To develop an engineered nanomachinery for surface display of enzymes, a fusion protein consists of streptavidin followed by a flexible linker and a cell wall binding domain derived from Bacillus subtilis cell wall hydrolase, LytE, is designed. Since each streptavidin subunit can self‐assemble into the tetrameric state and capture an enzyme (β‐lactamase in this study) carrying a streptavidin binding tag (SBP), a 140‐kDa complex is expected to form. Also, the tetrameric streptavidin fusion can potentially enhance the cell wall binding avidity. To examine the display efficiency, linkers with different lengths (51 and 151 amino acids) in the streptavidin fusions are designed. SDS‐PAGE results showed that the streptavidin fusions could be displayed as tetramers on the cell surface. Enzyme assay and Western blot showed that SBP‐tagged β‐lactamase could be captured to the cell surface. Interestingly, cells displaying streptavidin fusions with a longer linker showed 44% higher β‐lactamase activity. Longer linker is suggested to offer better surface accessibility of the displayed streptavidin fusions. This system can potentially be applied to display one or multiple species of SBP‐tagged proteins on the cell surface.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».