Fura-2 Calcium Imaging Is a Valid Method of Investigating Signalling & Integrative Properties of the Subfornical Organ
Notice bibliographique
Résumé
Research into the integration of signalling molecules at the subfornical organ (SFO) is typically conducted through in vitro electrophysiology methods on dissociated SFO neurons. We performed Fura-2 calcium imaging on dissociated SFO neurons and compared our observations to past electrophysiology data to determine if our imaging protocol can be used as an alternative, high-throughput method to investigate the integrative properties of the SFO. Sequential bath-application of 10-8 M cholecystokinin (CCK), a signalling molecule involved in energy balance, and 10-8 M Angiotensin-II (ANG), an excitatory signalling molecule involved in fluid balance, was performed on dissociated SFO neurons in hypoglycemic (1 mM glucose), normoglycemic (5 mM glucose), and hyperglycemic (10 mM glucose) conditions. ANG caused an increase in intracellular calcium ([Ca2+]i) in 32.8% (n = 20/61), 53.7% (n = 29/54) and 69.8% (n = 30/43) of SFO neurons at 1, 5 and 10 mM glucose, respectively, which is similar to the proportion of SFO neurons which depolarized to ANG in electrophysiology experiments [33.3% (n = 4/12) at 1 mM, 50.0% (n = 16/32) at 5mM, and 72.7% (n = 8/11) at 10 mM glucose]. These results suggest that ANG-related depolarizations and detectable [Ca2+]i increases are associated with each other. CCK caused an increase in [Ca2+]i in 31.1% (n = 19/61), 35.2% (n = 19/54), and 44.2% (n = 19/43) of SFO neurons at 1, 5 and 10 mM glucose, respectively, which is similar to the overall proportion of CCK-responsive neurons in electrophysiology experiments [41.2% (n = 7/17) at 1mM, 48.9% (n = 22/45) at 5 mM, and 47.6% (n = 10/21) at 10 mM glucose]. CCK elicits both excitatory and inhibitory responses, so our results suggest that increases in [Ca2+]i may be associated with both types of events. Lastly, we observed four subpopulations of SFO neurons: those who respond exclusively to ANG (n = 48/158), those who respond exclusively to CCK (n = 26/158), those who respond to both peptides (n = 31/158), and those who respond to neither peptide (n = 53/158). The observation of four subpopulations aligns with past electrophysiological data. Overall, our results suggest that SFO neurons respond to ANG and CCK similarly in imaging and electrophysiology trials and that Fura-2 calcium imaging is a reliable high-throughput method for researching signal transduction and the integrative properties of the SFO.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».