Auto-Inhibitory Mechanism for the Regulation of a P4-ATPase
Notice bibliographique
Résumé
Drs2p, a yeast type IV P-type ATPase (P4-ATPase), or flippase, couples ATP hydrolysis to phosphatidylserine (PS) translocation and the establishment of membrane asymmetry.A previous study has shown that affinity-purified Drs2p, possessing an N-terminal tandem affinity purification tag (TAPN-Drs2), retains ATPase and translocase activity, but Drs2p purified using a C-terminal tag (Drs2-TAPC) was inactive (Zhou & Graham, 2009).In this study, we show that the ATPase activity of N-terminally purified Drs2p associates primarily with a proteolyzed form of Drs2p lacking the C-terminal cytosolic tail.Truncation of most of the Drs2p C-terminal tail sequence activates its ATPase activity by approximately 4-fold.These observations are consistent with the hypothesis that the C-terminal tail of Drs2p is auto-inhibitory to Drs2p activity.Phosphatidylinositol-4-phosphate (PI(4)P) has been shown to positively regulate Drs2p activity in isolated Golgi membranes through interaction with the C-terminal tail (Natarajan et al., 2009).In proteoliposomes reconstituted with purified, N-terminally TAP-tagged Drs2p, both ATPase activity and flippase activity were significantly higher in the presence of PI(4)P.In contrast, PI(4)P had no significant effect on the activity of a truncated form of Drs2p, which lacked the C-terminal tail.This work provides the first direct evidence, in a purified system, that a phospholipid flippase is subject to autoinhibition by its C-terminal tail, which can be relieved by a phosphoinositide to stimulate flippase activity.
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
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