Characterizing the role of lipid 'raft' microdomain association of glycophosphatidyinositol-anchored proteins in their trafficking in hepatoblastoma cells
Notice bibliographique
Résumé
Many membranes in mammalian cells appear to be organized into various types of 'microdomains,' submicron regions that can be enriched in certain lipids and membrane proteins.'Lipid rafts,' one of the most widely investigated classes of such microdomains, are proposed to constitute small cholesterol-and sphingolipid-enriched membrane regions, with protein and lipid compositions distinct from those of 'non-raft' regions of the membrane, that have been suggested to be involved in a variety of cellular functions from signaling to protein trafficking.One class of 'raft-associating' proteins, glycosylphosphatidylinositol-anchored (GPI-) proteins, are anchored to the exoplasmic leaflet of the membrane via a raft-associating glycophospholipid anchor.It has been suggested previously that 'raft' partitioning acts as an apical targeting mechanism for GPIproteins in hepatoblastoma HepG2 cells and other polarized cell lines.To investigate the role of 'rafts' in the apparent preferential targeting of many GPI-proteins to the apical surface of the plasma membrane, I employed a novel approach using artificial lipid-anchored protein bioconjugates as GPI-protein analogues.I first developed optimized conditions to label polarized HepG2 cells with two novel types of lipid-polyethyleneglycol(PEG)-protein conjugates, generated using SNAP-and Halo-tag technologies, before investigating how the conjugates trafficked in these cells.Our results showed that when initially incorporated into the basolateral membranes of HepG2 cells, conjugates with long-chain saturated or unsaturated lipid 'anchors' gradually redistribute within the cell and ultimately become enriched in the apical membrane, to a degree similar to that observed for endogenous GPI-proteins.These findings counter earlier suggestions that apical trafficking of GPI-proteins in HepG2 cells is driven by (and hence dependent on) the propensity for the GPI-protein anchor to associate with rafts.
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Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».