Development of novel LAMP and qPCR assays for rapid and specific identification of Bronze birch borer (Agrilus anxius)
Notice bibliographique
Résumé
Buprestids are an emerging threat to broadleaf forests across the world. Bronze birch borer (Agrilus anxius, BBB) poses a serious threat to European birch species if the insect were to be introduced. Due to their cryptic lifestyle feeding on the vas-cular tissue of their host plants, buprestids and other wood borers can be difficult to observe or detect. Early detection tools are vital to swiftly implement eradica-tion measures and prevent the establishment of introduced species. In this study, we developed novel qPCR and LAMP assays for BBB and investigated the specific-ity and sensitivity for their use as early detection tools in European forests. Plant chemicals may limit these assays, so we conducted sensitivity testing with extracted foliage and plant vascular tissues to determine potential inhibition effects on DNA amplification. Both assays were specific to the target species when tested against the DNA of 17 other European Agrilus/buprestid species, two Scolytinae, and five Cerambycids (N= 24). Both assays varied in sensitivity with the qPCR assay ampli-fying at a concentration as low as 20 fg/μL, whereas the LAMP assay amplified as low as 3.2 pg/μL. Plant chemicals in DNA extracts from leaves did not impact the sensitivity of either assay, reaching similar detection levels. In contrast, vascular tis-sue reduced the sensitivity of the LAMP assay, amplifying as low as 0.04 ng/μL com-pared with 0.008 ng/μL in the control. These results demonstrate that both assays are highly specific and sensitive tools that can be used to detect frass and identify larvae as well as monitor the spread of A. anxius. qPCR resulted in more sensitive than LAMP overall. Thus, if results are needed quickly to make fast management de-cisions or as an initial screening of samples, the LAMP method is optimal. However, if fine detection is critical, then qPCR is preferential.
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».