Notice bibliographique
Résumé
Growing retinal stem cell (RSC) clonal spheres in traditional static culture is associated with low expansion rate and poor survival attributed to loss of cells during the enzymatic dissociation steps. Another problematic issue is the difficulty to mimic in vivo stem cell niche conditions. Using our traditional lab protocol, only 0.2% of the pigmented ciliary epithelium cells (CE) give rise to floating RSC clonal spheres in serum free conditions. These issues have hindered our ability to study the signaling pathways governing RSC proliferation and expansion in vitro. To overcome these limitations, I used microcarriers (MCs) in a suspension stirring bioreactor (SSB) to help achieve sufficient numbers suitable for differentiation and transplantation. Using this new protocol, I achieved a significant (10-fold) enrichment of RSC yield compared to conventional static culture techniques using a combination of FACTIII MCs and relative hypoxia (5%) inside the bioreactor. My work showed that hypoxia (5% O2) was associated with better RSC expansion across all platforms which was attributed to hypoxia-induced boosting survival and/or symmetric division of stem cells. RSC spheres were thought to be unvaried and were randomly picked and placed on laminin extracellular matrix (ECM) in static plates. In my work, I found noticeable variance in the pigment distribution between RSC spheres which led me to categorize them into three different groups according to their pigmentation, I also noted that this variance in pigment level and distribution was associated with contrasting differentiation potentials. RSCs were classified into three morphological groups: heavily pigmented (HP), lightly pigmented (LP) and centrally pigmented (CP) spheres. Unlike the other two sphere types, CP spheres were capable of producing highly proliferative progenitors (producing large number of cobblestone-like cell lawns) in adherent culture that differentiate into retinal pigment epithelium (RPE) cells. I found that the individual stem cells that (clonally) formed the three sphere types appear homogeneous, but it is their downstream progenitors that are different. I showed that CP spheres contain a population of early RPE progenitors that respond to proliferative signals from the surrounding non-pigmented neural retinal cells while The HP and LP spheres do not respond to these signals.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».