Piridoxina associada ao selênio sobre a função ovariana, desenvolvimento embrionário inicial e desempenho reprodutivo de fêmeas suínas

Este estudo teve por objetivo deteminar os efeitos da piridoxina combinada com selênio dietético (Se) sobre o sistema antioxidante, alguns aspectos da função ovariana, desenvolvimento embrionário inicial e desempenho reprodutivo em leitoas. Três experimentos foram conduzidos usando 45, 18 e 84 leitoas, respectivamente. No primeiro experimento (45 animais), as leitoas foram distribuidas aleatoriamente em uma das cinco dietas experimentais: 1) dieta basal (CONT); 2) dieta basal + 0,3 mg/kg de Na-selenito (MSeB60); 3) dieta 2 + 10 mg/kg de HCl-piridoxina (MSeB610); 4) dieta basal + 0,3 mg/kg de levedura enriquecida com Se (OSeB60); and 5) dieta 4 + 10 mg/kg def HCl-piridoxina (OSeB610). Amostras de sangue foram coletadas no dia seguinte a cada estro e ao abate (perfil de longo prazo), e diariamente do dia -4 ao dia +3 do quarto estro (perfil peri-estral). Ao abate (dia 3 após o quarto estro), fígado, rins e ovários foram coletados e a taxa de ovulação acessada. No segundo experimento (18 animais), apenas os tratamentos CONT, MSeB610 e OSeB610 foram utilizados. Todas as leitoas foram inseminadas ao quinto estro e eutanaziadas cinco dias após para coleta de embriões. Um micro-arranjo específico para embriões suínos foi utilizado para detectar genes diferentemente expressos entre MSeB610 vs CONT, OSeB610 vs CONT e OSeB610 vs MSeB610. No terceiro experimento (84 animais), os cinco tratamentos previamente descritos foram utilizados. Amostras de sangue para os perfis de longo prazo e peri-estral foram realizadas como descrito para o primeiro experimento. Ao abate (dia 30 após o quinto estro), fígado, rins, embriões e corpos lúteos foram coletados e a taxa de ovulação acessada. De maneira geral, os resultados para o perfil de longo prazo mostram que a concentração sanguínea de Se em leitoas CONT foi menor que em leitoas suplementadas com Se (P < 0,05) e que OSe foi maior que MSe (P < 0,05). Menores concentrações de piridoxal-5-fosfato (P-5-P) nos eitrócitos foi encontrada em leitoas B60 que em B610 (P < 0,05). Para o perfil peri-estral (primeiro e terceiro experimento), os efeitos dos tratamentos sobre o Se sanguíneo e a P-5-P plasmática foram similares aos do perfil de longo prazo. A atividade da Se-glutationa peroxidase sanguínea (GPX) foi maior nas leitoas suplementadas com Se que nas CONT (P < 0,05) e MSe foi maior que OSe (P < 0,01), mas não para a GPX plasmática (P > 0,27). A concentração de Se no fígado foi menor em leitoas CONT que em suplementadas com Se (P < 0,01), enquanto menor concentração de Se nos embriões foi encontrada no grupo CONT que nos suplementados com Se (P < 0,01) e OSe foi maior que MSe (P = 0,06). As análises de expressão genética por PCR relevaram que GPX1, GPX3, GPX4 e selenocisteina liase estavam fortemente expressados em leitoas OSeB610 (P < 0,05). As análises de micro-arranjo mostraram 10, 247 e 96 genes diferentemente expressos em MSeB610 vs CONT, OSeB610 vs CONT e OSeB610 vs MSeB610, respectivamente. A comparação OSeB610 vs CONT regulou positivamente genes relacionados com a síntese global de proteínas, mas não com a síntese de selenoproteínas. Em conclusão geral, a homeostase do Se e a atividade da GPX no sangue total em leitoas são significativamente impactados pelo nível e fonte de Se durante o período peri-estral. No entanto, a atividade da GPX no plasma sanguíneo foi afetada pela suplementação com vitamina B6. Esses resultados sugerem que a B6 dietética modula a rota metabólica do OSe para a ativação do sistema GPX e que seu efeito combinado pode estar envolvido na função ovariana levando à otimização das condições de ovulação. Além disso, OSeB610 afeta o metabolismo do blastocisto expandido suíno mais marcadamente que MSeB610 e estimula seletivamente genes envolvidos com a defesa antioxidante. A gestação parece exercer efeitos importantes sobre as concentrações sanguíneas de Se e plasmáticas de vitamina B6 e proteínas. A transferência materna de Se para os embriões inicia precocemente na gestação. Os efeitos negativos da vitamina B6 sobre o homogeneidade da leitegada merecem estudos adicionais.

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