Nonradioactive Detection of Retroviral- Associated RNase H Activity in a Microplate-Based, High-Throughput Format
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
None of the available antiretroviral drugs that are currently used in the clinic to treat infection with HIV-1 is directed against the RNase H active site of the reverse transcriptase. Here we developed a nonradioactive, 96-well plate assay designed to be used for high-throughput screening of compounds capable of inhibiting the RNase H activity of HIV-1 reverse transcriptase. We employed a tRNA as substrate that was labeled with digoxygenin-modified reporter residues. The labeled tRNA was prehybridized with a DNA oligonucleotide that contained a single biotinylated residue at its 5'-terminus to ensure its attachment to streptavidin-coated microplates. The uncleaved, immobilized DNA/tRNA substrate was detected through the use of established ELISA protocols. Incubation with purified HIV-1 reverse transcriptase initiated RNase H degradation and caused a signal reduction to negligible background levels. In contrast, the signal intensity remained unaffected when using an RNase H deficient mutant enzyme. The assay was validated using the hydrazone derivative BBNH that was previously shown to inhibit RNase H degradation below concentrations of 10 microM.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle