3 P66SHC, BUT NOT P53, IS INVOLVED IN EARLY ARREST OF IN VITROPRODUCED BOVINE EMBRYOS
Notice bibliographique
Résumé
High embryo losses occur in the first week of bovine embryo development, before the activation of the embryonic genome, with a high percentage of embryo death and arrest. Arrested embryos appear morphologically normal and do not exhibit any characteristic sign of apoptosis, including DNA fragmentation. We hypothesized that these embryos enter a senescence-like state and that both the cell cycle regulatory protein p53 and the stress-related protein p66shc, which are involved in the onset of senescence in somatic cells, are responsible for this early embryonic arrest of development. The aim of this study was to characterize the expression of p53 and p66shc in 2–4 cell-arrested bovine embryos. Our experimental model consists of in vitro-produced bovine embryos, co-cultured with oviductal cells. In our in vitro production system 86.8 ± 41.4% of embryos cleave, 13.5 ± 0.5% arrest at the 2–4 cell stage and 24.5 ± 0.7% develop to the blastocyst stage. Cleavage occurs between 26 hours post-insemination (hpi) and 48 hpi. Embryos that cleave by 28 hpi show only 0.6 ± 0.3% of 2–4 cell arrest and 41.2 ± 2.1% of blastocyst development, whereas 14.2 ± 0.9% of later-cleaving embryos arrest at the 2–4 cell stage and only 26.5 ± 1.7% develop into blastocysts. We compared 2–4 cell embryos collected at 28 hpi with those arrested at the 2–4 cell stage and collected at Day 8 post-insemination. Quantification by Real Time PCR showed significantly higher p66shc mRNA levels (P < 0.001), but no changes in p53 mRNA levels (P = 0.860) in arrested embryos v. 28-hpi embryos (n = 3 pools of 100 embryos each). We obtained the same pattern of p53 and p66shc mRNA expression when we compared 28-hpi embryos with later-cleaving embryos (28 hpi to 48 hpi, n = 3 pools of 100 embryos each), and higher p66shc mRNA levels (P < 0.050), or similar p53 mRNA levels (P = 0.960). We also confirmed higher p66shc protein levels (P < 0.001), but no changes in p53 protein levels (P = 1.000), in later cleaving embryos compared with 28 hpi-cleaving embryos by semi-quantitative immunocytochemistry (n = 70). Statistical analysis was carried out using 2-sample t-test or the equivalent nonparametric test (Mann-Whitney test). Taken together, these results demonstrate that the developmental potential of in vitro-produced embryos is related to the time of first cleavage and that p66shc, but not p53, plays a role in early developmental arrest of in vitro-produced bovine embryos. Further experiments are required to investigate the functional role of p66shc in early embryo arrest. Funded by NSERC, CIHR, OGS and OMAFRA.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».