Inhibitors of Phosphoinositide 3‐Kinase, LY294002 and Wortmannin, Affect Sperm Capacitation and Associated Phosphorylation of Proteins Differently: Ca<sup>2+</sup>‐Dependent Divergences
Notice bibliographique
Résumé
Sperm capacitation is regulated by multiple pathways that also control sperm motility and tyrosine (Tyr) phosphorylation of several sperm proteins. Among the reported pathways, phosphoinositide 3-kinase (PI3K) signaling and its role in modulating sperm postejaculatory changes and motility remain elusive. It was shown that wortmannin, a selective inhibitor of PI3K, prevents human sperm acrosome reaction. Using LY294002 (2-(4-morphlinyl)-8-phenyl-4H-1-benzopyran-4-one), another chemically different inhibitor of PI3K, it was suggested that this enzyme inhibits human sperm motility. In this study, we used the 2 known inhibitors of PI3K to investigate their effect on sperm capacitation and associated protein phosphorylation events. Our data show that sperm incubated with LY294002 undergo capacitation and increased Tyr phosphorylation of specific sperm proteins in a manner similar to that promoted by the capacitation inducer fetal cord serum ultrafiltrate (FCSu), as well as double phosphorylation of the threonine (Thr)-glutamine (Glu)-Tyr motif. Under similar conditions, wortmannin did not affect these sperm functions on its own, although it did prevent the effect induced by FCSu. Consistently, wortmannin decreased the phospho (P)-Tyr content of sperm proteins and prevented the phosphorylation of their Thr-Glu-Tyr motif. We also show by means of immunoblotting and cell fractionation experiments the presence of PI3K and its downstream effector Akt (protein kinase B) at the membrane level, as well as sperm heads and flagella. Our data show that human spermatozoa contain a consensus motif usually phosphorylated by Akt and that its P-serine (Ser)/Thr content is increased by both LY294002 and FCSu, while it is decreased by wortmannin. In addition, the 2 inhibitors differently affected the intracellular calcium concentration, [Ca(2+)](i). While LY294002 increased [Ca(2+)](i), wortmannin did not affect its content and did not prevent the LY294002 effect. Thus, we propose that the LY294002-promoted increase in [Ca(2+)](i) operates independently of PI3K. In conclusion, we suggest that special care be taken when using LY294002 to investigate the role that PI3K plays in a cellular phenomenon.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».