66 IN VITRO DEVELOPMENT OF YAK (POEPHAGUS MUTUS) CLONED EMBRYOS BY INTERSPECIES SOMATIC NUCLEAR TRANSFER
Notice bibliographique
Résumé
Interspecies nuclear transfer (NT) is an important tool for preservation of endangered animal species. This study was carried out to clone Yak (Poephagus mutus) embryos by using Yak skin fibroblasts and bovine (Bos taurus) recipient cytoplasts, and to compare the efficiency of YAK interspecies NT (bovine cytoplast-Yak donor cell) and bovine somatic NT (bovine cytoplast-bovine donor cell). Recipient oocytes were extracted from antral follicles of bovine ovaries, and subsequently cultured in maturation medium for 18–20 h in 5% CO2 and 95% humidified air at 39°C. Cumulus cells were removed from the oocytes by vortexing also facilitated further enucleation. Yak skin fibroblast cells were prepared from cultured ear explants of an adult 5-year-old female. Fibroblasts were cultured at passage 6–9 in 10% FBS DMEM at 37°C in 5% CO2 humidified air. The donor cell at a diameter of 19–20 µm was inserted into the perivitelline space of an enucleated oocyte. A bovine female cell line at similar passage number was used for bovine somatic NT as control. Somatic cell-cytoplast pairs were then fused by applying two direct current pulses at 2.0 kV/cm for a duration of 6–10 µs/pulse. Fused embryos were activated in 10 µg/mL cycloheximide and 2.5 µg/mL cytochalasin D in M199 plus 7.5% FBS for 5 h. Reconstructed Yak embryos were cultured in CR1aa plus 6 mg/mL BSA for 2 days (initiation of activation = Day 0) at 39°C, 5% CO2, 5% O2, and 90% N2, and then in 7.5% FBS CR1aa medium for 5 successive days on bovine cumulus monolayers. Expanding and hatching blastocysts on Day 7 were recorded and cryopreserved for further embryo transfer trials. The percentage of cleavage and the development to morulae and blastocysts were statistically analyzed using a General Linear Model (GLM, Univariate, SPSS 9.0, SPSS Inc, Chicago, IL, USA). As indicated in Table 1, the results demonstrated that the efficiencies of fusion rate as well as developmental potential in vitro were significantly higher in the bovine somatic NT group compared to those of the Yak interspecies NT group. However, the morphology and cell number per embryo of interspecies Yak cloned embryos were indistinguishable from those of bovine NT embryos. Our data suggest that bovine oocytes possess the capability of reprogramming/reactivation of the genome from differentiated somatic Yak nuclei. Table 1. Comparison of yak interspecies and bovine somatic nuclear transfer
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».