Förster resonance energy transfer measurements of cofactor‐dependent effects on protein arginine <i>N</i>‐methyltransferase homodimerization
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Notice bibliographique
Résumé
Protein arginine N-methyltransferase (PRMT) dimerization is required for methyl group transfer from the cofactor S-adenosyl-L-methionine (AdoMet) to arginine residues in protein substrates, forming S-adenosyl-L-homocysteine (AdoHcy) and methylarginine residues. In this study, we use Förster resonance energy transfer (FRET) to determine dissociation constant (K(D)) values for dimerization of PRMT1 and PRMT6. By attaching monomeric Cerulean and Citrine fluorescent proteins to their N-termini, fluorescent PRMTs are formed that exhibit similar enzyme kinetics to unconjugated PRMTs. These fluorescent proteins are used in FRET-based binding studies in a multi-well format. In the presence of AdoMet, fluorescent PRMT1 and PRMT6 exhibit 4- and 6-fold lower dimerization K(D) values, respectively, than in the presence of AdoHcy, suggesting that AdoMet promotes PRMT homodimerization in contrast to AdoHcy. We also find that the dimerization K(D) values for PRMT1 in the presence of AdoMet or AdoHcy are, respectively, 6- and 10-fold lower than the corresponding values for PRMT6. Considering that the affinity of PRMT6 for AdoHcy is 10-fold higher than for AdoMet, PRMT6 function may be subject to cofactor-dependent regulation in cells where the methylation potential (i.e., ratio of AdoMet to AdoHcy) is low. Since PRMT1 affinity for AdoMet and AdoHcy is similar, however, a low methylation potential may not affect PRMT1 function.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle