Mutations in the Dimerization Domain of the b Subunit from the Escherichia coli ATP synthase
Notice bibliographique
Résumé
The b subunit dimer of Escherichia coli ATP synthase serves essential roles as an assembly factor for the enzyme and as a stator during rotational catalysis. To investigate the functional importance of its coiled coil dimerization domain, a series of internal deletions including each individual residue between Lys-100 and Ala-105 (b(deltaK100)-b(deltaA105)), b(deltaK100-A103), and b(deltaK100-Q106) as well as a control b(K100A) missense mutation were prepared. All of the mutants supported assembly of ATP synthase, but all single-residue deletions failed to support growth on acetate, indicating a severe defect in oxidative phosphorylation, and b(deltaK100-Q106) displayed moderately reduced growth. The membrane-bound ATPase activities of these strains showed a related reduction in sensitivity to dicyclohexylcarbodiimide, indicative of uncoupling. Analysis of dimerization of the soluble constructs of b(deltaK100) and the multiple-residue deletions by sedimentation equilibrium revealed reduced dimerization compared with wild type for all deletions, with b(deltaK100-Q106) most severely affected. In cross-linking studies it was found that F1-ATPase can mediate the dimerization of some soluble b constructs but did not mediate dimerization of b(deltaK100) and b(deltaK100-Q106); these two forms also were defective in F1 binding analyses. We conclude that defective dimerization of soluble b constructs severely affects F1 binding in vitro, yet allows assembly of ATP synthase in vivo. The highly uncoupled nature of enzymes with single-residue deletions in b indicates that the b subunit serves an active function in energy coupling rather than just holding on to the F1 sector. This function is proposed to depend on proper, specific interactions between the b subunits and F1.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».