Inhibition of glutamine‐dependent autophagy increases t‐PA production in CHO Cell fed‐batch processes
Pourquoi ce travail est dans la base
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Notice bibliographique
Résumé
Understanding the cellular responses caused by metabolic stress is crucial for the design of robust fed-batch bioprocesses that maximize the expression of recombinant proteins. Chinese hamster ovary cells were investigated in chemically defined, serum-free cultures yielding 10(7) cells/mL and up to 500 mg/L recombinant tissue-plasminogen activator (t-PA). Upon glutamine depletion increased autophagosome formation and autophagic flux were observed, along with decreased proliferation and high viability. Higher lysosomal levels correlated with decreased productivity. Chemical inhibition of autophagy with 3-methyl adenine (3-MA) increased the t-PA yield by 2.8-fold. Autophagy-related MAP1LC3 and LAMP2 mRNA levels increased continuously in all cultures. Analysis of protein quality revealed that 3-MA treatment did not alter glycan antennarity while increasing fucosylation, galactosylation, and sialylation. Taken together, these findings indicate that inhibition of autophagy can considerably increase the yield of biotechnology fed-batch processes, without compromising the glycosylation capacity of cells. Monitoring or genetic engineering of autophagy provides novel avenues to improve the performance of cell culture-based recombinant protein production.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle