Kinetic Studies of HPr, HPr(H15D), HPr(H15E), and HPr(His∼P) Phosphorylation by the <i>Streptococcus salivarius</i> HPr(Ser) Kinase/Phosphorylase
Notice bibliographique
Résumé
HPr is a central protein of the phosphoenolpyruvate:sugar phosphotransferase transport system (PTS). In streptococci, HPr can be phosphorylated at His(15) at the expense of PEP by enzyme I (EI) of the PTS, producing HPr(His approximately P). HPr can also be phosphorylated at Ser(46) by the ATP-dependent HPr(Ser) kinase/phosphorylase (HprK/P), producing HPr(Ser-P). Lastly, HPr can be phosphorylated on both residues, producing HPr(Ser-P)(His approximately P) (HPr-P2). We report here a study on the phosphorylation of Streptococcus salivarius HPr, HPr(H15D), HPr(H15E), and HPr(His approximately P) by HprK/P to assess the involvement of HprK/P in the synthesis of HPr-P2 in streptococcal cells. We first developed a spectrophotometric method for measuring HprK/P kinase activity. Using this assay, we found that the K(m) of HprK/P for HPr at pH 7.4 and 37 degrees C was approximately 110 muM, with a specificity constant (k(cat)/K(m)) of 1.7 x 10(4) M(-1) s(-1). The specificity constants for HPr(H15D) and HPr(H15E) were approximately 13 times lower. Kinetic studies conducted under conditions where HPr(His approximately P) was stable (i.e., pH 8.6 and 15 degrees C) showed that HPr(His approximately P) was a poorer substrate for HprK/P than HPr(H15D), the k(cat)/K(m) for HPr(H15D) and HPr(His approximately P) being approximately 9 and 26 times lower than that for HPr, respectively. Our results suggested that (i) the inefficiency of the phosphorylation of HPr(His approximately P) by HprK/P results from the presence of a negative charge at position 15 as well as from other structural elements and (ii) the contribution of streptococcal HprK/P to the synthesis of HPr-P2 in vivo is marginal.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».