Application of nonporous polyurethane (PU) membranes and porous PU thin films as sample supports for MALDI-MS of wheat proteins
Notice bibliographique
Résumé
Non-porous polyurethane (PU) membranes and porous PU thin films are used as sample supports for MALDI-TOFMS. Mass spectra obtained are compared with those acquired using metal targets and the crushed matrix method. The compounds characterized are wheat proteins which consist of moderately water-soluble gliadins, and of water-insoluble low molecular weight (LMW) and high molecular weight (HMW) glutenins. Mass spectra obtained using the PU supports are in general of good quality, and this method of sample preparation is the most convenient for sample handling. In the case of gliadins and LMW glutenins, the spectra obtained on PU are comparable with those obtained using metal supports. Isolation of the LMW and HMW wheat proteins characterized in this study requires the use of buffers incompatible with MALDI. Spectra of samples containing buffer components on PU supports are of better quality than those obtained using the crushed matrix method. This effect is attributed to stronger protein binding onto the PU supports, which allows for extensive washing and removal of water soluble buffer components. The PU film, when cast onto a MALDI probe, is porous and flat in topology. The differences in surface characteristics between the PU film and the PU membrane result in slight variations in the mass spectra. The extent of surface charging, observed significantly using 50 µm thick PU membranes, decreases with 25 µm membranes and becomes insignificant with PU thin films. An important advantage of using the PU supports is the possibility of preparing samples on the film or membrane in the field and of analysing them at a later time. This is especially important when samples are susceptible to chemical degradation in solution. These proteins are known to degrade while stored in solution. We have thus incorporated the use of PU membranefilm supports into our routine analysis of these proteins.Key words: gliadins, glutenins, MALDI, membrane supports, polymeric supports, time-of-flight analysis.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».