Role of Cysteine Residues in Thiol Modification of Acyl-CoA:Diacylglycerol Acyltransferase 2 from Yeast
Notice bibliographique
Résumé
Acyl-CoA:diacylglycerol acyltransferase (EC 2.3.1.20, DGAT or DAGAT), which catalyzes the final step in triacylglycerol biosynthesis, has at least two discrete family members (DGAT1 and DGAT2) with different physiological roles. Here we report a systematic study of the local functional and structural role of seven cysteine residues present in DGAT2 from Saccharomyces cerevisiae (ScDGAT2, also known as Dga1p) using chemical modification in combination with site-directed mutagenesis. We demonstrate that although DGAT2 was susceptible to various thiol-modifying reagents, none of the cysteines were directly involved in the catalytic activity. Analysis of the accessibility of the sulfhydryl groups revealed that cysteines are also not involved in formation of intramolecular disulfide linkages. Inhibition of DGAT activity with thiol-specific reagents was localized to cysteine 314, which was found to be in the proximity of a highly conserved motif of DGAT2. Our work indicates that although this cysteine does not play a role in enzymatic catalysis, it may reside in a crucial position that is near a possible active site of DGAT2 or related to proper folding of the protein.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».