Protein S-Glutathiolation Triggered by Decomposed<i>S</i>-Nitrosoglutathione
Notice bibliographique
Résumé
Recombinant human brain calbindin D(28K) (rHCaBP), human Cu,Zn-superoxide dismutase (HCuZnSOD), rabbit muscle glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH), and bovine serum albumin (BSA) were found to be S-glutathiolated in decomposed S-nitrosoglutathione (GSNO) solutions. Tryptic or Glu-C digestion and MALDI-TOF MS analyses of the digests are consistent with S-thiolation of Cys111 and Cys187 of HCuZnSOD and rHCaBP, respectively, upon exposure to decomposed GSNO. GAPDH activity analysis reveals that S-glutathiolation most likely occurs on the active site Cys149, and the single free Cys34 is assumed to be the site of S-glutathiolation in BSA. The yields of S-glutathiolation of rHCaBP, GAPDH, and BSA were much higher than those of HCuZnSOD. The latter is limited by the accessibility of Cys111 to the glutathiolating reagent in the HCuZnSOD dimer. Unlike decomposed GSNO, fresh GSNO, reduced glutathione (GSH), and oxidized glutathione (GSSG) are not efficient S-glutathiolating agents for the proteins examined here. On the basis of analysis by mass spectrometry and UV-visible absorption, GSNO decomposition in the dark at room temperature yields glutathione disulfide S-oxide [GS(O)SG], glutathione disulfide S-dioxide (GSO(2)SG), and GSSG as products. GS(O)SG is the efficient protein S-glutathiolating agent in GSNO solutions, not GSNO, which does not carry out efficient S-glutathiolation of rHCaBP, HCuZnSOD, or GAPDH in vitro. A hydrolysis pathway yielding GSOH and nitroxyl (HNO/NO(-)) as intermediates is proposed for GSNO decomposition in the dark. This is based on inhibition of GSNO breakdown by dimedone, a reagent specific for sulfenic acids, and on nitroxyl scavenging by metmyoglobin. The results presented here are contrary to numerous reports of protein S-thiolation by low-molecular weight S-nitrosothiols.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».