Influence of chemical denaturants on the activity, fold and zinc status of anthrax lethal factor
Notice bibliographique
Résumé
Anthrax lethal factor (LF) is a zinc-dependent endopeptidase which, through a process facilitated by protective antigen, translocates to the host cell cytosol in a partially unfolded state. In the current report, the influence of urea and guanidine hydrochloride (GdnHCl) on LF׳s catalytic function, fold and metal binding was assessed at neutral pH. Both urea and GdnHCl were found to inhibit LF prior to the onset of unfolding, with the inhibition by the latter denaturant being a consequence of its ionic strength. With the exception of demetallated LF (apoLF) in urea, unfolding, as monitored by tryptophan fluorescence spectroscopy, was found to follow a two-state (native to unfolded) mechanism. Analysis of the metal status of LF with 4-(2-pyridylazoresorcinol) (PAR) following urea or GdnHCl exposure suggests the enzyme to be capable of maintaining its metal ion passed the observed unfolding transition in a chelator-inaccessible form. Although an increase in the concentration of the denaturants eventually allowed the chelator access to the protein׳s zinc ion, such process is not correlated with the release of the metal ion. Indeed, significant dissociation of the zinc ion from LF was not observed even at 6 M urea, and only high concentrations of GdnHCl (>3 M) were capable of inducing the release of the metal ion from the protein. Hence, the current study demonstrates not only the propensity of LF to tightly bind its zinc ion beyond the spectroscopically determined unfolding transition, but also the utility of PAR as a structural probe.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».