Use of adenovirus protein IX (pIX) to display large polypeptides on the virion—generation of fluorescent virus through the incorporation of pIX-GFP
Notice bibliographique
Résumé
The adenovirus (Ad) protein IX (pIX) is a minor component of the Ad capsid and associates with the hexons that make up the facets of the icosahedron. In this study, we investigated whether a large protein tag could be fused to pIX without compromising the Ad vector itself. As proof-of-principle, we generated a pIX-green fluorescent protein (GFP) fusion protein. We show that a virus encoding the pIX-GFP can be generated and that pIX-GFP fusion protein was incorporated into the Ad capsid as efficiently as native pIX. In tissue culture, translocation of Ad/pIX-GFP from the outside of the cell to the nucleus could be followed using fluorescence microscopy, and the timing of migration to the nucleus was similar to that previously reported for Ad. We also could track the virus after injection into the tibialis anterior muscle of mice. Shortly after injection, the majority of the Ad/pIX-GFP accumulated in pockets adjacent to the muscle fibers, with some migration of the virus between fibers. Our ability to attach GFP to the Ad virion, through fusion to pIX, provides a valuable tool for virus tracking in vitro and in vivo. Moreover, our data indicate that pIX can be used as a platform to anchor proteins to the Ad capsid, such as large ligands for cell-type-specific targeting of the vector.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».