Green fluorescent protein fused to peptide agonists of two dissimilar G protein‐coupled receptors: novel ligands of the bradykinin B<sub>2</sub> (rhodopsin family) receptor and parathyroid hormone <scp>PTH</scp><sub>1</sub> (secretin family) receptor
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
We hypothesized that peptide hormone sequences that stimulate and internalize G protein-coupled receptors (GPCRs) could be prolonged with a functional protein cargo. To verify this, we have selected two widely different pairs of peptide hormones and GPCRs that nevertheless share agonist-induced arrestin-mediated internalization. For the parathyroid hormone (PTH) PTH1 receptor (PTH1R) and the bradykinin (BK) B2 receptor (B2R), we have designed fusion proteins of the agonists PTH1-34 and maximakinin (MK, a BK homologue) with the enhanced green fluorescent protein (EGFP), thus producing candidate high molecular weight ligands. According to docking models of each hormone to its receptor, EGFP was fused either at the N-terminus (MK) or C-terminus (PTH1-34) of the ligand; the last construction is also secretable due to inclusion of the preproinsulin signal peptide and has been produced as a conditioned medium. EGFP-MK has been produced as a lysate of transfected cells. Using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for GFP, average concentrations of 1.5 and 1670 nmol/L, respectively, of ligand were found in these preparations. The functional properties and potential of these analogs for imaging receptor-expressing cells were examined. Microscopic and cytofluorometric evidence of specific binding and internalization of both fusion proteins was obtained using recipient HEK 293a cells that expressed the cognate recombinant receptor. Endosomal colocalization studies were conducted (Rab5, Rab7, β-arrestin1). Evidence of agonist signaling was obtained (expression of c-Fos, cyclic AMP responsive element (CRE) reporter gene for PTH1-34-EGFP). The constructs PTH1-34-EGFP and EGFP-MK represent bona fide agonists that support the feasibility of transporting protein cargoes inside cells using GPCRs.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle