Use of a murine secreted alkaline phosphatase as a non‐immunogenic reporter gene in mice
Notice bibliographique
Résumé
BACKGROUND: The development of any vector system as a gene delivery system requires its optimization in vitro and in vivo. Preliminary studies frequently involve the use of a reporter gene, which allows for the rapid and simple assay of vector function through monitoring expression levels of the reporter gene. However, evaluation of vector efficacy can be compromised by immune responses directed against immunogenic reporter proteins. METHODS: We have cloned a murine secreted alkaline phosphatase (mSEAP), and explored its use as a reporter gene in the context of an early region 1 (E1)-deleted adenovirus (Ad) vector. Studies involved characterization of gene expression in vitro and in vivo, and immunological responses after gene delivery to mice. RESULTS: In tissue culture, we show that mSEAP is easily measured quantitatively using a sensitive, commercially available chemiluminescent assay, or visualized directly using histological staining. The level of transgene expression from AdmSEAP was similar to that observed for an Ad vector encoding the human placental secreted alkaline phosphatase (hSEAP). After intravenous administration in mice, AdmSEAP continued to express at high levels for the duration of the experiment (1 month), whereas expression from AdhSEAP declined to background levels over the course of the experiment. Although cytotoxic T-lymphocytes were not detected against either the murine or human SEAP proteins in mice, antibodies were readily detected against the human protein. No antibodies were detected to mSEAP. CONCLUSIONS: Taken together, these data illustrate that mSEAP is a sensitive, non-immunogenic reporter gene for preclinical mouse studies.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,002 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,002 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,002 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,002 | 0,003 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,004 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».