Limitations to the amplification and stability of human tissue-type plasminogen activator expression by Chinese hamster ovary cells
Notice bibliographique
Résumé
Chinese hamster ovary cell production of recombinant tissue-type plasminogen activator (t-PA) was increased by amplification of cotransfected dihydrofolate reductase cDNA using stepwise adaptation to increasing methotrexate (MTX) concentrations. The highest producing clones were isolated at 5 microM MTX and yielded 26,000 U/10(6) cells/day t-PA (43 microgram/10(6) cells/day). Above 25 microM MTX, cell specific t-PA production rates became increasingly variable and the cDNA copynumbers decreased. No apparent correlation between the cell specific t-PA production rate and the growth rate was observed upon subcloning of the amplified cells. When MTX selection was removed, the t-PA production rate decreased up to tenfold within 40 days; this was accompanied by an up to 60% drop in cDNA copynumber. Subclones isolated after 108 days of culture in the absence of MTX were, on average, sixfold more stable than their parental cells. In culture without MTX, the maximum stable t-PA production rate obtained (over 250 days) was 7000 +/- 750 U/10(6) cells/day (approximately 12 microgram/10(6) cells/day), approximately threefold lower than the maximum unstable levels of production reached under selective pressure. Taken together, these results define a wide range of the highest t-PA expression rates obtained under MTX selection, for which stable expression without selection has not been reported.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,005 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».