A common genetic system for functional studies of pitrilysin and related M16A proteases
Notice bibliographique
Résumé
Pitrilysin is a bacterial protease that is similar to the mammalian insulin-degrading enzyme, which is hypothesized to protect against the onset of Alzheimer's disease, and the yeast enzymes Axl1p and Ste23p, which are responsible for production of the a-factor mating pheromone in Saccharomyces cerevisiae. The lack of a phenotype associated with pitrilysin deficiency has hindered studies of this enzyme. Herein, we report that pitrilysin can be heterologously expressed in yeast such that it functionally substitutes for the shared roles of Axl1p and Ste23p in pheromone production, resulting in a readily observable phenotype. We have exploited this phenotype to conduct structure-function analyses of pitrilysin and report that residues within four sequence motifs that are highly conserved among M16A enzymes are essential for its activity. These motifs include the extended metalloprotease motif, a second motif that has been hypothesized to be important for the function of M16A enzymes, and two others not previously recognized as being important for pitrilysin function. We have also established that the two self-folding domains of pitrilysin are both required for its proteolytic activity. However, pitrilysin does not possess all the enzymatic properties of the yeast enzymes since it cannot substitute for the role of Axl1p in the repression of haploid invasive growth. These observations further support the utility of the yeast system for structure-function and comparative studies of M16A enzymes.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».