A novel in vitro system for intracellular delivery of nonviral DNA
Notice bibliographique
Résumé
Articular chondrocytes are the main cell population in cartilage, and damage to them is a key step in osteoarthritis. There are chondrocyte-based strategies to treat osteoarthritis, among which includes nonviral gene therapy. However, so far there is no ideal way to achieve this because chondrocyte cells are very difficult to transfect. Also, an effective tracking system to evaluate exogenous DNA delivery in chondrocytes is a necessary part of this strategy. Here, we show our development of a novel tracking system by labelling cell membranes, nuclei, and plasmids, without disturbing their expression, to view the intracellular behaviour of plasmids before, after, and during the entire transfection process. We applied this system to compare the intracellular behaviour of exogenous DNA in chondrocytes and cancer cells. We also used this system to compare the intracellular behaviour of exogenous DNA which is transfected by liposomes or polymers. Finally, we discovered that when transfected by liposomes, exogenous DNA has a quicker cell entry and nucleus entry in cancer cells than in chondrocytes, and the transfection efficiency is higher in cancer cells than in chondrocytes. When the cells are transfected by polymers, exogenous DNA has the same quick cell entry and nucleus entry in both types of cells. However, the transfection efficiency was higher in cancer cells than in chondrocytes. Applying this system has proved to be simple, easy to operate, repeatable, and stable and it enables tracking of the behaviour of plasmid DNA before and after expression. Meanwhile, the rate-limiting zones of exogenous plasmid DNA in living cells and a comprehensive overview of the expression and transfection efficiency of DNA can also be obtained through this system, making it ideal for the research and development of nonviral DNA delivery systems.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».