High-Efficiency Retroviral Transduction of Mammalian Cells on Positively Charged Surfaces
Notice bibliographique
Résumé
The efficiency of retroviruses as transducing agents has been appreciated for many years, particularly for hematopoietic cell targets for which alternative strategies applicable to adherent cells are not effective. Advances in vector design, pseudotyping, and infection conditions have eliminated the need to cocultivate the target cells with virus-producing cells. Nevertheless, improvements are still needed for many applications, including those with a therapeutic or clinical cell-tracking objective. In this study we show that more positively charged surfaces, including those designed for the culture of anchorage-dependent cells, allow measurable levels of adhesion by different pseudotypes of retroviruses, which can result in increased gene transfer efficiencies to a variety of target cells including normal primary human hematopoietic cells as well as human leukemic cell lines and rat and murine fibroblasts. In the experiments with primary human cells, equal aliquots of enriched CD34+ cord blood cells were first stimulated for 2 days with cytokines (Flt3 ligand, Steel factor, IL-3, IL-6, and G-CSF) and then exposed for 4 days to a green fluorescent protein (GFP)- and Neo(r)-encoding retrovirus produced in PG13 cells. Both the final yield (approximately 300% relative to initial numbers), and the proportion (approximately 60%) of transduced CD34+ cells, colony-forming cells, and long-term culture-initiating cells were the same for cells infected either in tissue culture dishes or in fibronectin-coated petri dishes. Similar proportions (approximately 10%) and absolute yields of GFP+ human cells were also found in multilineage engrafted NOD/SCID mice assessed 6 to 8 weeks after being transplanted with these two types of transduced, but unselected, cells. These findings suggest a new and simpler approach for achieving high gene transfer efficiencies to hematopoietic cells.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».