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Enregistrement W2073706224 · doi:10.1002/jgm.1420

Improving adeno‐associated vector yield in high density insect cell cultures

2010· article· en· W2073706224 sur OpenAlex
Jimmy A. Mena, Marc G. Aucoin, Johnny Montes, Parminder S. Chahal, Amine Kamen

Pourquoi ce travail est dans la base

Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.

affAu moins un auteur déclare une institution canadienne dans l'instantané OpenAlex épinglé.

Notice bibliographique

RevueThe Journal of Gene Medicine · 2010
Typearticle
Langueen
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueViral Infectious Diseases and Gene Expression in Insects
Établissements canadiensUniversity of WaterlooNational Research Council CanadaBiotechnology Research Institute
Organismes subventionnairesnon disponible
Mots-clésMultiplicity of infectionBioreactorTiterYield (engineering)Recombinant DNACell cultureBaculoviridaeGenetic enhancementViral vectorBiologyVirologyTransduction (biophysics)Adeno-associated virusVector (molecular biology)VirusGeneMaterials scienceBiochemistryGeneticsSpodoptera

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

BACKGROUND: Recombinant adeno-associated virus (rAAV) are the most promising vectors for gene therapy. However, large-scale rAAV production remains a challenge for the translation of rAAV-based therapeutic strategies to the clinic. The baculovirus expression vector system (BEVS) has been engineered to produce high rAAV titers in serum-free suspension cultures of insect cells. METHODS: The typical approach of rAAV production in BEVS has been based on a synchronous infection with three baculoviruses at high multiplicity of infection (MOI) [>3 plaque forming units (pfu)/cell]. An alternative approach is to co-infect at low MOI (0.1 pfu/cell). Both strategies (high and low MOI) were compared at a cell density of 1.0 x 10(6) cells/ml in shake-flask experiments. To increase the rAAV titer, a low MOI combined with an initial cell density at infection of 5.0 x 10(6) cells/ml, in fed-batch mode, was evaluated. Subsequently, the production strategy was validated in 3-l bioreactor runs. RESULTS: An increase of 210% in the rAAV titer (4.7 x 10(11) enhanced transduction units/l) was observed when using low MOI, an effect primarily caused by the increase in cell density. The fed-batch approach resulted in a seven-fold increase of rAAV yield. Controlled operations in bioreactor contributed to further increase the rAAV yield (2.8 x 10(14) vector genomes/l) by 25% in comparison to the shake flask results. CONCLUSIONS: This high yield production process using low MOIs and a feeding strategy successfully addresses several limitations of current rAAV production in insect cells and contributes to position the BEVS system as one of the most efficient for large-scale manufacturing of rAAV vectors.

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Prédiction distillée sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,001
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,001
Version: codex-gemma-dda1882f352aStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesaucune
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Expérimental (laboratoire) · Signal consensuel: Expérimental (laboratoire)
GenreSignal candidat: Empirique · Signal consensuel: Empirique
Score de désaccord entre enseignants0,051
Score d'incertitude au seuil0,295

Scores Codex et Gemma par catégorie

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0010,001
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens large)0,0000,000
Bibliométrie0,0000,000
Études des sciences et des technologies0,0000,000
Communication savante0,0000,000
Science ouverte0,0000,000
Intégrité de la recherche0,0000,000
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,0000,000

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,008
Tête enseignante GPT0,241
Écart entre enseignants0,233 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle