Inexpensive and Generic Affinity Purification of Recombinant Proteins Using a Family 2a CBM Fusion Tag
Notice bibliographique
Résumé
The selective binding of the family 2a carbohydrate binding module (CBM2a) of xylanase 10A of the soil bacterium Cellulomonas fimi to a variety of cellulosic substrates is shown to provide a new, cost-effective affinity chromatography system for purification of recombinant protein. Genetic linkage of CBM2a to a target protein, in this case protein A from Staphylococcus aureus, results in a fusion protein that binds strongly to the particulate-cellulose resin Avicel PH101 and retains the biological activity of the fusion partner. Affinity purification of protein A-CBM2a from the supernatant of a recombinant E. coli JM101 culture results in a product purity of greater than 95% and a product concentration factor of 34 +/- 3. Measured column parameters are combined with one-dimensional equations governing continuity and intraparticle diffusion to predict product breakthrough curves with good accuracy over the range of realistic operating conditions. Peak spreading within the column is controlled by intraparticle diffusion for CBM2a and by a combination of film mass transfer and intraparticle diffusion for the larger protein A-CBM2a fusion protein.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».