Structure-Function Studies of Two Novel UDP-GlcNAc C6 Dehydratases/C4 Reductases
Notice bibliographique
Résumé
Two subfamilies of UDP-GlcNAc C6 dehydratases were recently identified. FlaA1, a short soluble protein that exhibits a typical SYK catalytic triad, characterizes one of these subfamilies, and WbpM, a large membrane protein that harbors an altered SMK triad that was not predicted to sustain activity, represents the other subfamily. This study focuses on investigating the structure and function of these C6 dehydratases and the role of the altered triad as well as additional amino acid residues involved in catalysis. The significant activity retained by the FlaA1 Y141M triad mutant and the low activity of the WbpM M438Y mutant indicated that the methionine residue was involved in catalysis. A Glu(589) residue, which is conserved only within the large homologues, was shown to be essential for activity in WbpM. Introduction of this residue in FlaA1 enhanced the activity of the corresponding V266E mutant. Hence, this glutamate residue might be responsible for the retention of catalytic efficiency in the large homologues despite alteration of their catalytic triad. Mutations of residues specific for the short homologues (Asp(70), Asp(149)-Lys(150), Cys(103)) abolished the activity of FlaA1. Among them, C103M prevented dimerization but did not significantly affect the secondary structure. The fact that we could identify subfamily-specific residues that are essential for catalysis suggested an independent evolution for each subfamily of C6 dehydratases. Finally, the loss of activity of the FlaA1 G20A mutant provided evidence that a cofactor is involved in catalysis, and kinetic study of the FlaA1 H86A mutant revealed that this conserved histidine is involved in substrate binding. None of the mutations investigated altered the substrate, product, and function specificity of these enzymes.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».