Synaptically-Competent Neurons Derived from Canine Embryonic Stem Cells by Lineage Selection with EGF and Noggin
Notice bibliographique
Résumé
Pluripotent stem cell lines have been generated in several domestic animal species; however, these lines traditionally show poor self-renewal and differentiation. Using canine embryonic stem cell (cESC) lines previously shown to have sufficient self-renewal capacity and potency, we generated and compared canine neural stem cell (cNSC) lines derived by lineage selection with epidermal growth factor (EGF) or Noggin along the neural default differentiation pathway, or by directed differentiation with retinoic acid (RA)-induced floating sphere assay. Lineage selection produced large populations of SOX2+ neural stem/progenitor cell populations and neuronal derivatives while directed differentiation produced few and improper neuronal derivatives. Primary canine neural lines were generated from fetal tissue and used as a positive control for differentiation and electrophysiology. Differentiation of EGF- and Noggin-directed cNSC lines in N2B27 with low-dose growth factors (BDNF/NT-3 or PDGFαα) produced phenotypes equivalent to primary canine neural cells including 3CB2+ radial progenitors, MOSP+ glia restricted precursors, VIM+/GFAP+ astrocytes, and TUBB3+/MAP2+/NFH+/SYN+ neurons. Conversely, induction with RA and neuronal differentiation produced inadequate putative neurons for further study, even though appropriate neuronal gene expression profiles were observed by RT-PCR (including Nestin, TUBB3, PSD95, STX1A, SYNPR, MAP2). Co-culture of cESC-derived neurons with primary canine fetal cells on canine astrocytes was used to test functional maturity of putative neurons. Canine ESC-derived neurons received functional GABA(A)- and AMPA-receptor mediated synaptic input, but only when co-cultured with primary neurons. This study presents established neural stem/progenitor cell populations and functional neural derivatives in the dog, providing the proof-of-concept required to translate stem cell transplantation strategies into a clinically relevant animal model.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».