Production, Characterization and Assay Application of a Purified, Baculovirus-Expressed, Serogroup Specific Bluetongue Virus Antigen
Notice bibliographique
Résumé
The predominant serodiagnostic assay used in many countries to detect bluetongue virus (BTV) infections is a competitive enzyme-linked immunosorbent assay (c-ELISA) which employs two critical reagents: a cell culture-derived BTV antigen and group-specific monoclonal antibody (Mab). Ongoing difficulties have been reported by laboratories in the production and quality control of the native antigen reagent which relies on the presence of adequate molar quantities and appropriate presentation of the major BTV core protein VP7. To address this important issue, a recombinant baculovirus was constructed containing a cDNA copy of genome segment 7 of BTV serotype 11 and used to infect insect cells which, in turn, expressed high levels of theVP7 protein with an estimated molecular mass of 39 kDa. In its purified form, this recombinant protein could be detected by group-specific Mabs designated 3.17.A3 and 8A3B.6 produced against BTV serotypes 1 and 17, respectively, as well as by polyclonal bovine antibodies raised against North American and South African BTV serotypes. No reactivity was observed by Western blot analysis with these two Mabs suggesting that the common antigenic determinants, on the BTV VP7 protein, were mainly conformational. It was interesting to note that the purified recombinant VP7 protein demonstrated a greater degree of reactivity with Mab 8A3B.6 compared to that exhibited with Mab 3.17.A3 when evaluated in an ELISA. Due to its antigenic similarity to the native antigen, the recombinant protein was found to be a suitable replacement for use in a c-ELISA to detect BTV-specific antibodies with the added advantage that it could be consistently produced and was, therefore, amenable to quality control testing for purity, stability and other standards.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».