Real-time electrochemical detection of pathogen DNA using electrostatic interaction of a redox probe
Notice bibliographique
Résumé
Electrostatic redox probes interaction has been widely rendered for DNA quantification. We have established a proof-of-principle by using the ruthenium hexaamine molecule [Ru(NH(3))(6)](3+). We have applied this method for real-time electrochemical monitoring of a loop mediated isothermal amplification (LAMP) amplicon of target genes of Escherichia coli and Staphylococcus aureus by square wave voltammetry (SWV). Ruthenium hexaamine interaction with free DNAs in solution without being immobilized onto the biochip surface enabled us to discard the time-consuming overnight probe immobilization step in DNA quantification. We have measured the changes in the cathodic current signals using screen printed low-cost biochips both in the presence and the absence of LAMP amplicons of target DNAs in the solution-phase. By using this novel probe, we successfully carried out the real-time isothermal amplification and detection in less than 30 min for S. aureus and E. coli with a sensitivity up to 30 copies μL(-1) and 20 copies μL(-1), respectively. The cathode peak height of the current was related to the extent of amplicon formation and the amount of introduced template genomic DNA. Importantly, since laborious probe immobilization is not necessary at all, and both the in vitro amplification and real-time monitoring are performed in a single polypropylene tube using a single biochip, this novel approach could avoid all potential cross-contamination in the whole procedure.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».