Construction and Characterization of an Acapsular Mutant of <i>Mannheimia haemolytica</i> A1
Notice bibliographique
Résumé
The nmaA and nmaB genes, which code for UDP-GlcNAc-2-epimerase and UDP-ManNAc-dehydrogenase, respectively, are involved in capsular polysaccharide biosynthesis in Mannheimia haemolytica A1. A chloramphenicol resistance (Cm(r)) cassette cloned behind an M. haemolytica A1 promoter, plpcat, was created and used to interrupt nmaA and nmaB. A 1.3-kbp DNA fragment that encompasses part of nmaA and nmaB was replaced by the 1.0-kbp plpcat, resulting in a knockout mutant which is Cm(r) and unable to synthesize N-acetylmannosamine (ManNAc) and N-acetylmannosaminuronic acid (ManNAcA). The DNA replacement was confirmed by Southern hybridization and PCR analyses of the nmaA and nmaB loci. Electron microscopy examination of the mutant showed the absence of capsular materials compared to the parent strain. The loss of NmaA and NmaB activity was confirmed by analysis of carbohydrate moieties using capillary electrophoresis. Serum sensitivity assays indicated that the acapsular mutant is as resistant as the encapsulated parent to complement-mediated killing by colostrum-deprived calf serum but is more sensitive to killing by immune bovine serum. Analysis of lipopolysaccharide prepared from the acapsular mutant and encapsulated parent confirmed that these strains have long O-polysaccharide chains, possibly conferring resistance to serum-mediated killing.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».