264 PORCINE SPERM-HEAD RECEPTOR INTERACTION WITH PROTEINS PERIPHERALLY BOUND TO THE OVIDUCTAL LUMEN
Notice bibliographique
Résumé
Here we show that cell–cell interaction between boar spermatozoa and the oviductal lumen surface are mediated by specific receptor–ligand binding. We have previously demonstrated increased sperm viability following incubation of boar spermatozoa with apical plasma membrane (APM) proteins from sow oviductal epithelial cells (Fazeli A et al. 2003 Reproduction 123, 509–517). Fresh intact oviducts were internally flushed with PBS and filled with Sulfo-NHS-LC-biotin (Pierce Biotechnology, Inc., Rockford, IL, USA) in PBS (pH 8.0). Each end was clamped and incubated for 30 min at RT. Unbound biotin was quenched with 50 mM ammonium chloride for 10 min, and biotinylated soluble APM (sAPM-B) preparations were prepared. Percoll-washed boar spermatozoa (25 × 106 mL-1) were incubated with sAPM-B (150 µg mL-1) for 40 min at 39°C in 5% CO2, and unbound sAPM-B was removed. The sperm pellet was resuspended in 0.5% SDS and incubated for 90 min at RT. Solubilized proteins were isolated by centrifugation at 14,000g for 5 min. The proteins were separated by SDS-PAGE alongside non-biotinylated APM and untreated “sperm-only” samples. Biotinylation was detected by NeutrAvidin/HRP. In addition, sAPM-B treated spermatozoa were smeared onto slides for the detection of biotinyl groups by anti-biotin/Alexa Fluor (Molecular Probes, Leiden, NL). NeutrAvidin/HRP Pierce detected a biotinylated sAPM band migrating to approximately 100 kDa in the sperm/sAPM-B sample. This band was not present in the “sperm-only” sample. Detection of in situ-labelled sAPM-B on spermatozoa showed that fluorescence was specific to the sperm head. We conclude that an oviductal protein of approximately 100 kDa is a potential viability-enhancing ligand for a sperm receptor that is mainly located over the acrosomal region. This study was funded by the BBSRC (UK).
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».