A rapid and universal tandem‐purification strategy for recombinant proteins
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
A major goal in the production of therapeutic proteins, subunit vaccines, as well as recombinant proteins needed for structure determination and structural proteomics is their recovery in a pure and functional state using the simplest purification procedures. Here, we report the design and use of a novel tandem (His)(6)-calmodulin (HiCaM) fusion tag that combines two distinct purification strategies, namely, immobilized metal affinity (IMAC) and hydrophobic interaction chromatography (HIC), in a simple two-step procedure. Two model constructs were generated by fusing the HiCaM purification tag to the N terminus of either the enhanced green fluorescent protein (eGFP) or the human tumor suppressor protein p53. These fusion constructs were abundantly expressed in Escherichia coli and rapidly purified from cleared lysates by tandem IMAC/HIC to near homogeneity under native conditions. Cleavage at a thrombin recognition site between the HiCaM-tag and the constructs readily produced untagged, functional versions of eGFP and human p53 that were >97% pure. The HiCaM purification strategy is rapid, makes use of widely available, high-capacity, and inexpensive matrices, and therefore represents an excellent approach for large-scale purification of recombinant proteins as well as small-scale protein array designs.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle