Solid-phase PCR with hybridization and time-resolved fluorometry for detection of HLA-B27.
Pourquoi ce travail est dans la base
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Notice bibliographique
Résumé
BACKGROUND: Preactivated solid surfaces provide new possibilities for multiple consecutive reactions in a microtiter plate format. In this study, a combination of PCR and subsequent hybridization in the same microtiter well was applied for the detection of HLA-B27 alleles. METHODS: A multiplex solid-phase PCR to amplify the HLA-B27 alleles together with beta-actin as an amplification control gene was performed on the NucleoLink (Nunc) surface. PCR was followed by hybridization and detection with time-resolved fluorescence. For the covalent capture of the PCR primers onto the solid support via a 1-(3-dimethylamino-propyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride-mediated reaction, different 5'-end modifications of oligonucleotides were tested [amination, phosphorylation, and a poly(dT)10 linker]. RESULTS: For covalent immobilization of the primers, amination of the 5' end combined with use of the poly(dT)10 linker was superior. At least 19.5% of the primer added per well was attached via a stable bond. When the standard time-resolved, fluorescence-based HLA-B27 detection system was compared with the newly developed method in a sample series of 82 genomic DNAs and the corresponding dried-blood spots, all results were in full agreement. CONCLUSIONS: The new solid-phase PCR approach can be applied for multiple-target DNA detection. PCR followed by hybridization can be accomplished in a few hours using precoated strips and dried-blood spot PCR templates.
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Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle