In Situ Measurement of Oligomerization State of NBCe1‐A in Kidney Tissues using Spatial Fluorescence Intensity Fluctuation Analysis
Notice bibliographique
Résumé
NBCe1‐A plays an important role in absorbing sodium bicarbonate across the basolateral membrane of the proximal tubule. We have previously showed that minimal functional unit of NBCe1‐A is a monomer, and based on in‐vitro biochemical studies in HEK293 cells, the oligomeric state of the cotransporter was shown to be predominantly dimeric with monomeric and higher oligomeric forms also present. In the present study, we developed an in situ measurement methodology to determine the oligomeric state of NBCe1‐A without requiring tissue disruption. We used fluorescent moment image analysis and spatial intensity distribution analysis (SpIDA) to study the oligomeric state of NBCe1‐A. Both methods allow for unbiased quantitative measurement of fluorescent particle densities and oligomerization states within individual images acquired with laser‐scanning microscopy. Initially we examined basal membranes of highly adherent CHO K1 cells expressing eGFP‐tagged NBCe1‐A, and showed that NBCe1‐A existed primarily in the monomeric state and negligibly in the dimeric state on the cell membrane. We immunolabeled NBCe1‐A in kidney tissues demonstrating the NBCe1‐A is present in dimeric and rarely in higher order oligomeric states. As a control, we compared the results obtained from LSM images of tissues of NBCe1‐A knockout mouse. These experiments demonstrate for the first time the in situ oligomeric state(s) of NBCe1‐A.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».