Assessment of the Enzymatic Activity and Inhibition using HPFA with a Microreactor, Trypsin, Absorbed on Immobilized Artificial Membrane
Notice bibliographique
Résumé
The purpose of this study was to develop a new method to assess the activity and inhibition of the immobilized enzyme trypsin based on the frontal analysis of enzymatic reaction products. This novel technique was performed by on-line monitoring of the absorption at 253 nm of N-benzoyl-L-arginine (BA) from the hydrolysis of N-benzoyl-L-arginine ethyl ester (BAEE). A microreactor was constructed by immobilizing trypsin on an immobilized artificial membrane (IAM)-packed column. Trypsin was non-covalently and dynamically immobilized on-line in the hydrophobic interface of an IAM liquid chromatographic stationary phase. The trypsin-IAM stationary phase was bioactive. Due to the enzymatic reaction, the substrate of BAEE was completely hydrolyzed when the BAEE concentration was below 0.5 mmol/L and partly hydrolyzed when the BAEE concentration ranged from 0.75 to 1.0 mmol/L. By the addition of soybean trypsin inhibitor (STI), phenylmethane sulfonyl fluoride (PMSF), and benzamidine into the substrate solution, the results obtained from the frontal analysis showed that the activity of trypsin on IAM was strongly inhibited not only by STI but by both benzamidine and PMSF.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».