Microplate-Based Colorimetric Detection of Free Hydrogen Sulfide
Notice bibliographique
Résumé
Hydrogen sulfide (H2S) has recently been recognized as an important physiologically relevant gasotransmitter. Produced by the enzymes involved in the transsulfuration pathway, cystathionine β-synthase (CBS) and cystathionine γ-lyase (CSE), H2S has been implicated to control biological activity in virtually every organ system. In recent years it is being recognized that many commonly used H2S assays do not measure free H2S specifically and may be prone to artifacts. This has led to large variations in the reported H2S biological concentrations. In order to accurately study H2S's functions in biological systems accurate assays which measure free H2S specifically are required. In this work we present a simple microplate-based colorimetric assay for H2S gas. The underside of a 96-well microplate cover was coated with Nafion polymer doped with Ag(+) ions. H2S is a highly volatile gas, and as it is volatilized in the microplate well it reacts with Ag(+) to produce Ag2S nanoparticles, which have a strong absorbance in the low-UV range. By monitoring the absorbance change from formation of Ag2S nanoparticles, H2S production can be monitored in real time. The assay has a limit of detection (LOD) of 2.61 nmol (8.70 μM) and a liner range up to 30 nmol (100 μM). Using the assay, the KM and Vmax of recombinant CSE enzyme were determined to be 11.13 ± 0.57 mM and 0.45 ± 0.01 nmol min(-1), respectively. H2S production from mouse liver homogenate under aerobic conditions in the presence of cysteine was measured and determined to be 4.89 ± 0.19 nmol min(-1) mL(-1) homogenate. The assay is simple, low cost, and specific to free H2S gas.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».