Tandem Affinity Purification in Transgenic Mouse Embryonic Stem Cells Identifies DDOST as a Novel PPP1CC2 Interacting Protein
Notice bibliographique
Résumé
Members of the PP1 family of protein phosphatases achieve functional diversity through numerous and varied protein-protein interactions. In mammals, there are four PP1 isoforms, the ubiquitously expressed PPP1CA, PPP1CB, and PPP1CC1, and the testis specific splice isoform PPP1CC2. When the mouse Ppp1cc gene is deleted, the only phenotypic consequence is a failure of spermatogenesis in homozygous males. To elucidate the function of the Ppp1cc gene, we sought to identify novel protein-protein interactions. To this end, we have created SBP-3XFLAG-PPP1CC1 and SBP-3XFLAG-PPP1CC2 knock-in mouse embryonic stem cell lines using a gene-trap-based system. Tandem affinity purification using our knock-in cell lines identified 11 significant protein-protein interactions, including nine known PP1 interacting proteins and two additional proteins (ATP5C1 and DDOST). Reciprocal in vitro sedimentation assays confirmed the interaction between PPP1CC2 and DDOST that may have physiological implications in spermatogenesis. Immunolocalization studies revealed that DDOST localized to the nuclear envelope in dissociated spermatogenic cells and persists throughout spermatogenesis. The knock-in system described in this paper can be applied in creating tandem affinity-tagged knock-in embryonic stem cell lines with any gene for which a compatible gene-trap line is available.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».