Cloning, sequence analysis, and prokaryotic expression vector construction of glycosyltransferase gene BcUGT8 from Bupleurum chinense
Notice bibliographique
Résumé
Objective To clone the full-length cDNA of the uridine diphosphate glycosyltransferase(UGT) gene in Bupleurum chinense(BcUGT8),which may be involved with the saikosaponin biosynthesis,and to construct the prokaryotic expression vector.The work will provide the foundation for its further function verification by in vitro expression and activity analysis of the purified protein.Methods RACE and LD-PCR were used to clone the full-length cDNA of BcUGT8,on the basis of its partial cDNA sequence obtained from our previous high-flux sequencing by Roche(454) GS FLX system.The open reading form(ORF) was PCR cloned using primers with corresponding restriction enzymes cutting sites.The PCR products were digested with corresponding restriction enzymes and then were inserted in expression vector pET-28a(+) to construct the recombinant expression vectors.Results The full-length cDNA of UGT gene was cloned from B.chinense,and the prokaryotic expression vector was obtained.Conclusion The full-length cDNA cloning,sequence analysis,and prokaryotic expression vector construction provide a substantial foundation for follow-up bio-function analysis of BcUGT8 through protein expression,purification,and activity analysis in vitro.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».