Prokaryotic expression of recombinant human bFGF and production of high titer anti-serum against bFGF
Notice bibliographique
Résumé
Objective To prepare anti-human basic fibroblast growth factor (hbFGF) serum using recombinant hbFGF as an immunogen. Methods The prokaryotic expression vector for hbFGF was constructed using 5' terminal 12 codons modified by PCR, and was expressed in Escherichia coli (E. coli ). The high titer anti-hbFGF serum was prepared by immunizing New Zealand rabbits with purified hbFGF, and then analyzed by immunoblotting assay. Results The modified gene of hbFGF was highly expressed in E. coli. The recombinant hbFGF was purified (95%) from the soluble part and this recombinant protein was used to immunize rabbits. The titer of the antiserum after the second booster immunization was 1∶512 000 as determined by indirect ELISA. Immunoblotting analysis showed that this antiserum had specific reaction with both standard hbFGF and the recombinant hbFGF expressed in E. coli , and even had weak cross-reactivity with some bacterial proteins. This weak cross-reactivity was abolished after treating the antiserum with bacterial lysates. Conclusion High titer antiserum against hbFGF is produced using purified recombinant hbFGF as the immunogen and the weak cross-reactivity of the anti-serum can eliminated by bacterial lysate absorption.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».