Polymerase Chain Reaction-Mediated Mutagenesis in Sequences Resistant to Homogeneous Amplification
Notice bibliographique
Résumé
For many biologists, the polymerase chain reaction (PCR) has become an indispensable tool serving many diverse applications, from simple DNA amplification to complex diagnostics. In basic research, a very important application has been the use of PCR in the introduction of site-specific mutations into target DNA ( 1 , 2 ). A simple and commonly used example of this approach is the two-step “megaprimer” method Fig. 1 ), in which the mutant oligomer is first incorporated into DNA in one direction, then this DNA itself is used as a megaprimer to complete the mutant sequence in the other direction (3). Over the years, such an approach has been used in many laboratories with considerable success. In the authors’ experiments, this approach has been used for over a decade to introduce many changes into the ribosomal genes of yeast cells ( 4 – 6 ). Although some modifications were made some modifications in the amplification conditions ( 7 ), to improve the efficiency of the megaprimer method, the basic strategy, as originally described, has proven to be effective and reliable in most instances. Overview of the two-step megaprimer method for PCR-mediated mutagenesis. These keywords were added by machine and not by the authors. This process is experimental and the keywords may be updated as the learning algorithm improves.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,003 | 0,002 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,002 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,002 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,002 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,003 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,004 | 0,007 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».