Cloning and expression of fusion (F) protein gene of Newcastle disease virus (NDV)
Notice bibliographique
Résumé
The present study was undertaken to amplify, clone and express Fusion (F) protein gene of Newcastle disease virus. The freeze-dried virus of pigeon origin was propagated in embryonated chicken eggs. RNA was isolated from the infected allantoic fluid and cDNA was synthesized by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). Primers specific to F gene incorporated with restriction enzyme sites, viz. NdeI and XhoI were used to amplify the F gene using cDNA as a template by polymerase chain reaction (PCR). The 1680 bp F gene amplicons were gel-purified and first cloned into TOPO vector. Positive clone was confirmed by colony PCR and restriction enzyme digestion. TOPO released insert was ligated with NdeI and XhoI digested pET22b expression vector using T4 DNA ligase and transformed into E.coli. Recombinant clones were selected by colony PCR and restriction enzyme digestion and induced with 0.5 mM final concentration of Isopropyl-1-thio-b-D-galactosidase (IPTG) for the expression of the recombinant F protein. The expressed protein of 55 kDa was obtained during the 4 h post-induction. The obtained recombinant protein reacted with rabbit anti serum in Western blot confirming it to be NDV specific.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».