The trans-membrane 17βHSD7: Kinetic study and preliminary crystallization data
Notice bibliographique
Résumé
Human 17β-Hydroxysteroid dehydrogenase type 7 (h17HSD7) is a transmembrane enzyme belonging to the large, phylogenetically related protein family of short-chain dehydrogenases/reductases (SDR). In this study, h17HSD7 was expressed, purified, and the steady-state kinetics was studied. Here we report a purification method of the transmembrane enzyme using FPLC equipment with a combination of detergents to obtain homogeneous protein. We also report steady-state kinetics for h17HSD7 at 37 degrees Celsius and pH 7.5, using a homogeneous enzyme preparation with estrone (E1), or dihydrotestosterone (DHT) as substrate and NADPH as the cofactor. Kinetic studies made over a wide range of concentrations of both steroids (2microM to 60microM) revealed that E1 (Km= 12microM) has a higher apparent affinity for the h17BHSD7 compared to DHT (Km= 44microM). Crystallization of h17HSD7 in complex with high concentration of steroids to saturate the enzyme in the drop as low apparent affinity of both steroids was found in kinetic study. Some preliminary crystals were obtained by hanging-drop and diffracted at synchrotron facility (Maximum resolution: 2.95Å , Space group: H 3 2, Average unit cell: 120.74 120.74 201.94 90 90 90, Mosaicity : 0.51).
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».