In Vitro Erythroid Cell Expansion Analysis in Polycythemia Vera.
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Polycythemia vera (PV) is an acquired myeloproliferative clonal stem cell disorder characterized by cytokine hypersensitivity. The erythroid colony forming assay has been useful in PV diagnosis. However, studies aiming to elucidate molecular mechanism in PV pathogenesis often require large numbers of cells from a specific erythroid stage. For this purpose, we had adapted the mouse expansion assay described by Karur et al (Blood, 2006 in E-Pub) and differential display method described by Zhang et al (Blood, 2003, 102; 3938) to develop a human erythroid expansion protocol. In this study, we used peripheral blood mononuclear cells (PB-MNCs) from PV patients and healthy donors, and expanded them along erythroid lineage in 21 day culture. Through the culture, we took samples at 8 timepoints (days 1, 7, 9, 11, 14, 16, 19, 21) to evaluate differentiation patterns. We had generated 5 different regions using CD71 (transferrin receptor) and CD235a (glycophorin A) and characterized these regions by standard morphology analysis. This protocol allowed differentiation of PB-MNCs to all erythroid stages ending with late normoblast, reticulocyte, and mature erythrocytes (which do not survive well in this culture environment). The erythroid differentiation and proliferation patterns were different between PV and normal. In the first week of culture, there was no significant proliferation difference observed between PV and normal. In contrast, the differentiation progressed more rapidly in PV, likely reflecting the differentiation of Epo independent PV population (since the first week culture contains no Epo). In the second week of culture (Epo present), there was a markedly increased expansion of PV erythroid cells. However, the differentiation pattern of PV resembled that of normal. In conclusion, we demonstrated that our in vitro expansion method allows expansion of PB-MNCs along erythroid lineage with 60~80% stage homogeneity as to the stage of differentiation in both PV and normal. The differences of differentiation and proliferation pattern between PV and normal reflected the expected biological behavior of erythroid progenitors. Thus, the expansion protocol is useful to study molecular mechanism of PV pathogenesis, which requires large number of erythroid progenitors of various stages.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».