Deletion of Hoxa Genes in Adult Mice Affects Hematopoietic Stem Cell and B Cell Progenitors
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Abstract 2359 BACKGROUND AND OBJECTIVE: Functional compensation between homeodomain proteins has hindered the ability to unravel their role in hematopoiesis using single gene knock-outs. Although several Hox genes can expand hematopoietic stem cells (HSC) when overexpressed, it remains unclear whether these genes are required for proper adult hematopoiesis. Moreover, it has been shown that HoxB genes are dispensable for hematopoiesis, and that expression of most HoxA genes is ten-fold superior to genes from other Hox clusters in HSC enriched fetal liver populations (Bijl, 2006). Using a haploinsufficient mice for the entire HoxA cluster (HoxA+/−), we have shown that adult HSCs and progenitors are particularly sensitive to HoxA gene levels (Lebert-Ghali, 2010). Thus, we hypothesize that HoxA genes have a crucial function in definitive hematopoiesis. MATERIALS AND METHODS: To assess the role of HoxA genes in definitive hematopoiesis, we used a conditional mutant mouse model for the entire HoxA cluster in combination with an inducible Mx-Cre model. The functional effect of HoxA cluster deletion on hematopoietic cells was analysed by culture and repopulation assays. RESULTS: Highly efficient excision of HoxA cluster was achieved by 7 doses of poly(I):poly(C) treatment (91–100%). Mice (control, n=3 and Mx-CreHoxAflox/flox, n=3) were sacrificed and analysed three days after the last injection. Immunophenotyping showed a 3 to 4 fold increase of CD150+/CD48-/CD244-/Sca+/c-kit+/Lin- hematopoietic stem cells. Despite the enhancement of the HoxA−/− HSC population, single cell cultures showed that their proliferative potential in response to growth factors was significantly reduced (p=0.036) as growth was observed only for 16.6 ± 14.4% of HoxA−/− compared to 42.4 ±10.3% of control HSCs after 3-weeks of culturing. In contrast, the number of multipotent progenitor (MPP) cells (CD34+/CD135+/Sca+/c-kit+/Lin-) was reduced, indicating a partial block from the short-term HSC (CD34+/CD135-/Sca+/c-kit+/Lin-) to the MPP transition. Colony forming cell assays showed a dramatic decrease of B-cell progenitors in the bone marrow (BM) (10-fold, p=0.0079), while myeloid progenitors were not affected by the deletion. Transplantation assays demonstrated that grafts composed of > 91% HoxA−/− HSCs have slower repopulation kinetics compared to control HSCs and strongly reduced long-term engraftment (37 ± 28% and 92 ± 6% for HoxA−/− and control, respectively, 20 weeks post-transplantation). Genotyping of engrafted donor cells is currently analyzed to confirm repopulation by HoxA−/− cells. Consistent with the observations in primary mice, peripheral blood analysis revealed also a dramatic reduction of B220+ B-cell population in mice transplanted with HoxA−/− BM cells compared to control (7.1 ± 8.5% and 56.2 ±4.8% respectively p=0,000002) Altogether, in vitro assays and transplantation assays revealed that the functions of HoxA−/− HSC seem to be impaired. CONCLUSION: Together, these results show that HoxA cluster genes are required for both HSC function and B cell development, indicating that these genes are important regulators of adult hematopoiesis. Disclosures: No relevant conflicts of interest to declare.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,006 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».