Application of protoplast technology to CRISPR/Cas9 mutagenesis: from single‐cell mutation detection to mutant plant regeneration
Pourquoi ce travail est-il dans la base ?
Une base qui oublie comment elle a trouvé un travail ne peut pas être vérifiée. Voici les voies qui ont admis celui-ci.
Aucune affiliation canadienne. Une base fondée sur la seule affiliation (le devis habituel) n'aurait jamais vu ce travail. C'est l'un des travaux qui justifient l'inversion de la base.
Scores machine (provisoires)
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
- Écart entre enseignants
- 0,254 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
- Statut de validation
score_only:v0-immature-baseline· tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle
Résumé
Plant protoplasts are useful for assessing the efficiency of clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR-associated protein 9 (Cas9) mutagenesis. We improved the process of protoplast isolation and transfection of several plant species. We also developed a method to isolate and regenerate single mutagenized Nicotianna tabacum protoplasts into mature plants. Following transfection of protoplasts with constructs encoding Cas9 and sgRNAs, target gene DNA could be amplified for further analysis to determine mutagenesis efficiency. We investigated N. tabacum protoplasts and derived regenerated plants for targeted mutagenesis of the phytoene desaturase (NtPDS) gene. Genotyping of albino regenerants indicated that all four NtPDS alleles were mutated in amphidiploid tobacco, and no Cas9 DNA could be detected in most regenerated plants.
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La notice
- Revue
- Plant Biotechnology Journal
- Thématique
- CRISPR and Genetic Engineering
- Domaine
- Biochemistry, Genetics and Molecular Biology
- Établissements canadiens
- —
- Organismes subventionnaires
- Institute of GeneticsAgricultural Biotechnology Research Center, Academia SinicaInstitute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of SciencesChinese Academy of SciencesAcademia Sinica
- Mots-clés
- BiologyCRISPRMutagenesisProtoplastCas9MutantGeneticsNicotiana tabacumDNAInsertional mutagenesisGenePhytoene desaturaseTransfectionMolecular biology
- Résumé présent dans OpenAlex
- oui