Covalent capture of OGT's active site using engineered human-<i>E. coli</i>chimera and intrastrand DNA cross-links
Notice bibliographique
Résumé
O 6-Alkylguanine DNA alkyltransferases (AGTs) are proteins found in most organisms whose role is to remove alkylation damage from the O6- and O4-positions of 2'-deoxyguanosine (dG) and thymidine (dT), respectively. Variations in active site residues between AGTs from different organisms leads to differences in repair proficiency: The human variant (hAGT) has a proclivity for removal of alkyl groups at the O6-position of guanine and the E. coli OGT protein has activity towards the O4-position of thymine. A chimeric protein (hOGT) that our laboratory has engineered with twenty of the active site residues mutated in hAGT to those found in OGT, exhibited activity towards a broader range of substrates relative to native OGT. Among the substrates that the hOGT protein was found to act upon was interstrand cross-linked DNA connected by an alkylene linkage at the O6-position of dG to the complementary strand. In the present study the activity of hOGT towards DNA containing alkylene intrastrand cross-links (IaCL) at the O6- and O4-positions respectively of dG and dT, which lack a phosphodiester linkage between the connected residues, was evaluated. The hOGT protein exhibited proficiency at removal of an alkylene linkage at the O6-atom of dG but the O4-position of dT was refractory to protein activity. The activity of the chimeric hOGT protein towards these IaCLs to prepare well defined DNA-protein cross-linked conjugates will enable mechanistic and high resolution structural studies to address the differences observed in the repair adeptness of O4-alkylated dT by the OGT protein relative to other AGT variants.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».