Promoter Cre‐Specific Genotyping Assays for Authentication of Cre‐Driver Mouse Lines
Notice bibliographique
Résumé
ABSTRACT The Cre‐LoxP system gene knockout (KO) technology provides cell‐ and time‐specificity of gene ablation to investigate cell‐autonomous gene function in vivo, and is paramount for understanding the function of genes involved in bone development, remodeling, and repair. This approach permits gene ablation in a cell‐ or tissue‐specific, differentiation stage‐specific, and inducible manner, thanks to the use of well‐chosen promoters that drive expression of the Cre recombinase in selected cells/tissues. The generation of these powerful tools has led to the expansion of Cre mouse lines available to the research community, which are often shared within and between laboratories. Although convenient and commonly used, genotyping these Cre lines with a generic set of primers that amplifies the Cre transgene does not distinguish between various Cre‐deleter lines. This practice poses the significant risk of mistakenly swapping Cre lineages, as laboratories often host and handle several lines at a time and utilize multiple lines per project. In line with the NIH‐led effort to promote authentication of biological reagents and increase scientific rigor, we report here strategies for designing appropriate sets of primers able to discriminate some of most widely used Cre‐deleter mouse lines in the field of bone biology, and the validation of 24 of them. © 2018 The Authors JBMR Plus published by Wiley Periodicals, Inc. on behalf of American Society for Bone and Mineral Research.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,006 | 0,010 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,003 | 0,002 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,002 | 0,002 |
| Bibliométrie | 0,006 | 0,002 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,002 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,002 | 0,004 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,008 | 0,015 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».